目的 探讨PTEN通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂敏感性的影响.方法 选择2016年1月至2018年1月于郑州大学附属肿瘤医院手术切除的60例NSCLC患者的癌组织标本及对应的癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm)标本,采用免疫组织化学染色检测癌组织和癌旁组织中PTEN蛋白表达.培养NSCLC细胞株A549,取对数生长期细胞并随机分为blank组(不作任何处理)、pcDNA-PTEN组(转染PTEN过表达质粒)、pcDNA-PTEN对照组(转染PTEN过表达对照质粒)、siRNA-PTEN组(转染siRNA-PTEN质粒)、siRNA-PTEN对照组(转染siRNA-PTEN对照质粒)、wortmannin组(转染PI3 K/AKT信号通路抑制剂)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组(转染PI3K/AKT信号通路激动剂)、pcDNA-PTEN+ IGF-1组(共转染pcDNA-PTEN过表达质粒和PI3 K/A KT信号通路激动剂),采用Lipofectamine 2000介导细胞转染,转染6h后更换为完全培养基,37℃培养48 h后收集细胞;采用定量反转录聚合酶链反应检测A549细胞中PTEN、PBK及AKT mRNA表达,Western blot法检测A549细胞中PTEN、H3K及AKT蛋白表达,Transwell实验检测A549细胞侵袭能力,划痕实验检测A549细胞迁移能力.取各组转染后培养48 h细胞,分别加入0.00、0.75、1.50、3.00、6.00、12.00 μmol·L-1顺铂,培
作者:陈利娟;穆晓倩;刘杰;张体鹏;赵艳秋
来源:新乡医学院学报 2020 年 37卷 6期