目的 分析人胰腺癌BxPC-3细胞上皮-间质转化(EMT)过程中微小RNA(miR)表达谱的差异.方法 培养BxPC-3细胞,设立转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导96 h组(TGF-β1处理组)与未经诱导组(对照组),倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Transwell-Matrigel体外侵袭试验检测细胞的侵袭迁移能力,实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测细胞EMT相关标记物的变化.采用miR微阵列芯片技术检测BxPC-3细胞EMT前后miR表达的变化.结果 在TGF-β1的刺激下,BxPC-3细胞拉长,细胞间连接变得疏松.Transwell试验显示,TGF-β1处理组BxPC-3细胞中侵袭细胞较对照组增多(P<0.05).上皮标记物上皮钙黏素的蛋白及mRNA表达水平均下降(P均<0.05),而其间质标记物波形蛋白、神经钙黏素蛋白及mRNA表达水平均升高(P均<0.05).提取BxPC-3细胞总RNA,2组细胞样本的A260/A280比值分别为2.03、2.06,变性琼脂糖凝胶电泳结果显示RNA无降解,提示BxPC-3细胞RNA纯度及完整性符合试验要求.RNA微阵列芯片技术筛选结果显示,BxPC-3细胞有26个miR的表达水平在诱导前后比较差异有统计学意义(P均<0.05),其中15个miR表达上调和11个miR表达下调.结论 人胰腺癌细胞EMT过程中miR表达谱发生了变化,其中26个miR的表达水平在诱导EMT前后存在差异.
作者：李博；马俊；贺欢；郭婉薇；宁晓燕；王丽萍；许鸣
来源：新医学 2017 年 48卷 9期
