目的 探讨沉默CXCR4基因对食管鳞癌EC109细胞体外增殖、侵袭能力的影响.方法 化学合成两对针对CXCR4基因的干扰序列(实验序列、对照序列),构建表达小发夹RNA(shRNA)的质粒,以壳聚糖为基因载体转染人食管癌EC109细胞.荧光显微镜观测转染效率,Western blot法分析转染前后CXCR4蛋白的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力,ELISA法检测转染前后EC109细胞上清液血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化.结果 酶切电泳、测序证实成功构建靶向CXCR4基因的shRNA表达质粒.以壳聚糖为载体转染HEK293A,转染效率达80％以上.与空白对照组、实验对照组比较:转染实验组质粒能明显下调CXCR4蛋白表达;抑制EC109细胞增殖,影响其集落形成能力;降低EC109细胞穿膜数目,影响其侵袭能力;时间依赖性降低EC109细胞上清液中VEGF水平,转染48 h及72 h后与空白对照组、实验对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CXCR4基因在食管癌细胞生长、侵袭方面发挥重要作用,沉默其表达可降低食管癌细胞增殖,抑制肿瘤细胞集落形成和侵袭能力,抑制细胞分泌VEGF能力.CXCR4基因有可能成为食管癌治疗新的、有效靶点.
作者：万一元；万莉；惠红霞；王晓炜；程劲松
来源：徐州医学院学报 2015 年 35卷 1期
