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目的 探索CD5分子对套细胞淋巴瘤化疗药物敏感性的影响及其分子机制.方法 Crispr/cas9法敲除人源套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1 (P)的CD5基因,构建Jeko-1 (N)(CD5 negative)细胞;RT-PCR检测Jeko-1(P)与Jeko-1 (N)细胞CD5-E1A和CD5-E1B表达;以不同浓度柔红霉素处理2种细胞,MTS法检测细胞增殖抑制效应;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测细胞凋亡抑制蛋白B淋巴细胞瘤2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、人粒细胞白血病1蛋白(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)、B淋巴细胞瘤XL蛋白(B-cell lymphoma-xl,Bcl-XL)的表达.结果 Jeko-1 (N)细胞不表达CD5-E1A、CD5-E1B;柔红霉素处理后,Jeko-1 (N)细胞抑制率高于Jeko-1 (P)细胞,IC50低于Jeko-1 (P)细胞(P<0.05),G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少(P<0.05),24 h、48h细胞凋亡率较Jeko-1 (P)增加,Bcl-2、Mcl蛋白表达量较Jeko-1 (P)细胞无明显变化,凋亡抑制蛋白Bcl-XL表达量上调.结论 CD5基因敲除的Jeko-1细胞株通过调控淋巴瘤细胞阻滞于G0/G1期,以及上调Bcl-XL蛋白的表达增强对柔红霉素的化疗敏感性.

作者:张哲;桑威;王莹;魏翔宇;闫冬梅;朱峰;徐林艳;徐开林

来源:徐州医学院学报 2016 年 36卷 5期

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作者:
张哲;桑威;王莹;魏翔宇;闫冬梅;朱峰;徐林艳;徐开林
来源:
徐州医学院学报 2016 年 36卷 5期
标签:
CD5 Jeko-1细胞株 柔红霉素 凋亡 CD5 cell line Jeko-1 daunorubicin apoptosis
目的 探索CD5分子对套细胞淋巴瘤化疗药物敏感性的影响及其分子机制.方法 Crispr/cas9法敲除人源套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1 (P)的CD5基因,构建Jeko-1 (N)(CD5 negative)细胞;RT-PCR检测Jeko-1(P)与Jeko-1 (N)细胞CD5-E1A和CD5-E1B表达;以不同浓度柔红霉素处理2种细胞,MTS法检测细胞增殖抑制效应;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测细胞凋亡抑制蛋白B淋巴细胞瘤2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、人粒细胞白血病1蛋白(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)、B淋巴细胞瘤XL蛋白(B-cell lymphoma-xl,Bcl-XL)的表达.结果 Jeko-1 (N)细胞不表达CD5-E1A、CD5-E1B;柔红霉素处理后,Jeko-1 (N)细胞抑制率高于Jeko-1 (P)细胞,IC50低于Jeko-1 (P)细胞(P<0.05),G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少(P<0.05),24 h、48h细胞凋亡率较Jeko-1 (P)增加,Bcl-2、Mcl蛋白表达量较Jeko-1 (P)细胞无明显变化,凋亡抑制蛋白Bcl-XL表达量上调.结论 CD5基因敲除的Jeko-1细胞株通过调控淋巴瘤细胞阻滞于G0/G1期,以及上调Bcl-XL蛋白的表达增强对柔红霉素的化疗敏感性.