基因组定点编辑技术通过可编码核酸酶切割基因组特定位点,进而诱导基因组定点突变.CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9)基因组编辑系统由Cas9核酸酶以及sgRNA(Single guide RNA)组成,与其他可编码核酸酶系统如锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFNs)和类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases,TALENs)相比具有更简便的操作性和更高的基因组定点编辑效率.目前在植物中已有多例应用CRISPR/Cas9系统进行基因组编辑的报道.本文从Cas9基因与sgRNA表达载体的构建策略,获得基因组定点编辑突变体的转化方法、突变的效率和特征、突变的检测方法等方面进行了总结,最后对植物中利用CRISPR/Cas9系统进行基因组编辑存在的问题以及发展前景进行了讨论.
作者：马兴亮；刘耀光
来源：遗传 2016 年 38卷 2期
