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为建立一种同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的方法,本研究根据GenBank中的ASFV 72基因和PRV UL27基因的保守序列分别设计2对特异性引物,通过对双重PCR反应条件的优化,建立快速检测ASFV和PRV的双重PCR方法,并对该方法的特异性和敏感性进行验证.特异性试验结果显示,该方法对ASFV与PRV核酸的扩增能获得246 bp和401 bp的特异性目的片段,而对PRRSV、PEDV和CSFV的核酸扩增均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对ASFV和PRV核酸最低检测量分别为0.01 pg和0.12 pg.结果表明:建立的双重PCR方法具有特异性强、敏感性较好、快速简便等特点,可用于这两种病毒的同时检测和鉴别诊断.

作者:王颖旺;陈燕凌;骆光梅;杨敏杰;田志革;胡晓亮

来源:畜牧兽医科技信息 2023 年 3期

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作者:
王颖旺;陈燕凌;骆光梅;杨敏杰;田志革;胡晓亮
来源:
畜牧兽医科技信息 2023 年 3期
标签:
非洲猪瘟病毒 猪伪狂犬病病毒 双重PCR 检测方法
为建立一种同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的方法,本研究根据GenBank中的ASFV 72基因和PRV UL27基因的保守序列分别设计2对特异性引物,通过对双重PCR反应条件的优化,建立快速检测ASFV和PRV的双重PCR方法,并对该方法的特异性和敏感性进行验证.特异性试验结果显示,该方法对ASFV与PRV核酸的扩增能获得246 bp和401 bp的特异性目的片段,而对PRRSV、PEDV和CSFV的核酸扩增均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对ASFV和PRV核酸最低检测量分别为0.01 pg和0.12 pg.结果表明:建立的双重PCR方法具有特异性强、敏感性较好、快速简便等特点,可用于这两种病毒的同时检测和鉴别诊断.