目的 建立测定血清中吡哆醇(VB6)、硫胺素(VB1)、烟酰胺、核黄素(VB2)含量的高效液相色谱方法(HPLC).方法 小鼠血清样品经Strata-X聚合物固相萃取柱(30 mg/ml)处理后收集洗脱液进样分析.采用Phenomenex/Luna C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3μm)分离,以50 mmol/L醋酸铵︰甲醇(99︰1,v/v)为流动相A,甲醇︰水(50︰50,v/v)为流动相B梯度洗脱,流速为0.6 ml/min,光电二极管阵列检测器检测波长设为VB1270 nm、烟酰胺256 nm、VB6257 nm,荧光检测器Ex450、Em520检测VB2.结果 本法测定VB6、VB1、烟酰胺、VB2的线性范围分别是0.09~3.0、0.09~3.0、0.19~6.0、0.02~0.5μg/ml,最低检测限分别为0.06、0.04、0.06、0.004μg/ml;日内和日间测定的VB6、VB1、烟酰胺、VB2标准品峰高的相对标准偏差分别为0.75%~2.66%和1.48%~3.22%,小鼠血清样品峰高的相对标准偏差分别为2.25%~4.03%和3.47%~4.50%;VB6、VB1、烟酰胺、VB2在样品中的加标回收率均值分别为94.1%、93.4%、99.4%、93.2%.结论 本方法简便、准确、灵敏,可用于测定小鼠血清中VB6、VB1、烟酰胺、VB2的含量.
作者:蒲玲玲;韦京豫;刘晋;李天;高蔚娜;郭长江
来源:营养学报 2017 年 39卷 6期