目的 研究SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARSCoV)S666蛋白与眼部功能性受体-血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)的结合作用.方法 构建SARS-CoV S666蛋白融合基因pS666-EGFP,并在哺乳动物细胞(293T细胞)中表达;酶联免疫吸附实验及流式细胞仪检测法进行SARS-CoV S666蛋白与结膜、角膜细胞及心、肺组织的体外结合研究.结果 构建了融合基因pS666-EGFP,琼脂糖凝胶电泳、SDS-PAGE及Western Blot分析证明SARS-CoV pS666-EGFP融合基因构建正确,基因表达产物与理论推算值相符,相对分子量约为100.7×103.酶联免疫吸附实验结果经析因方差分析显示:S666-EGFP蛋白与角膜上皮细胞、结膜成纤维细胞、结膜上皮细胞及结膜、角膜组织的结合能力比EGFP蛋白强(有统计学差异,P＜0.001).流式细胞仪检测结果显示:结膜上皮细胞、结膜成纤维细胞、角膜上皮细胞与S666-EGFP蛋白结合,但与EGFP蛋白均无结合.上述细胞及组织的结合能力较vero E6细胞及心、肺组织的结合能力稍弱.结合反应能够被ACE2抗体所阻滞,证实其为特异性结合.结论 SARS-CoV S666蛋白与结膜、角膜细胞能够结合,对了解SARS的病理机制及进一步研究SARS的防护和治疗具有一定的参考意义.
作者：孙琰；柳林；潘欣
来源：眼科新进展 2007 年 27卷 4期
