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目的 建立离体过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠白内障模型并观察茶多酚(tea polyphenols,TP)对H2O2诱导大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)中小窝蛋白-1(Caveolin-1)表达的影响.方法 采用离体晶状体培养技术,在一定浓度H2O2的MEM培养液中置入透明的SD大鼠晶状体,建立实验性白内障晶状体模型.设置空白对照组、H2O2组和TP (0.02 mg·mL-1、0.20 mg·mL-1、2.00 mg·mL-1)处理组,分别于不同时间点(0h、6h、12 h、24 h、48 h)取样,应用RT-PCR检测LEC中Caveolin-1 mRNA的表达,Western blot检测LEC中Caveolin-1蛋白的表达.结果 H2O2下调LEC中Caveolin-1表达,H2O2组加入H2O2 0 h、6h、12 h、24h、48 h Caveolin-1 mRNA表达分别为0.740±0.210、0.560±0.130、0.350±0.160、0.204±0.142、0.197±0.133,呈时间依赖性,在H2O2作用24 h时,Caveolin-1表达下调最明显(P<0.01),遂选定24 h为后续实验时间点.不同浓度的TP均可抑制LEC中Caveolin-1表达的减少,24 h时RT-PCR检测空白对照组、H2O2组、TP处理组(0.02 mg· mL-1、0.20 mg·mL-1、2.00 mg·mL-1)Caveolin-1 mRNA表达分别为0.687±0.141、0.112±0.124、0.341±0.115、0.562±0.102、0.584±0.098,Western-blot检测空白对照组、H2O2组、TP处理组(0.02 mg·

作者:刘丹;门保成;张姝

来源:眼科新进展 2013 年 33卷 7期

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刘丹;门保成;张姝
来源:
眼科新进展 2013 年 33卷 7期
标签:
茶多酚 白内障 小窝蛋白-1 过氧化氢 氧化损伤 晶状体上皮细胞 tea polyphenols cataract Caveolin-1 hydrogen peroxide oxidative damage lens epithelial cell
目的 建立离体过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠白内障模型并观察茶多酚(tea polyphenols,TP)对H2O2诱导大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)中小窝蛋白-1(Caveolin-1)表达的影响.方法 采用离体晶状体培养技术,在一定浓度H2O2的MEM培养液中置入透明的SD大鼠晶状体,建立实验性白内障晶状体模型.设置空白对照组、H2O2组和TP (0.02 mg·mL-1、0.20 mg·mL-1、2.00 mg·mL-1)处理组,分别于不同时间点(0h、6h、12 h、24 h、48 h)取样,应用RT-PCR检测LEC中Caveolin-1 mRNA的表达,Western blot检测LEC中Caveolin-1蛋白的表达.结果 H2O2下调LEC中Caveolin-1表达,H2O2组加入H2O2 0 h、6h、12 h、24h、48 h Caveolin-1 mRNA表达分别为0.740±0.210、0.560±0.130、0.350±0.160、0.204±0.142、0.197±0.133,呈时间依赖性,在H2O2作用24 h时,Caveolin-1表达下调最明显(P<0.01),遂选定24 h为后续实验时间点.不同浓度的TP均可抑制LEC中Caveolin-1表达的减少,24 h时RT-PCR检测空白对照组、H2O2组、TP处理组(0.02 mg· mL-1、0.20 mg·mL-1、2.00 mg·mL-1)Caveolin-1 mRNA表达分别为0.687±0.141、0.112±0.124、0.341±0.115、0.562±0.102、0.584±0.098,Western-blot检测空白对照组、H2O2组、TP处理组(0.02 mg·