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背景 年龄相关性白内障的发生、发展与长期氧化应激导致的细胞凋亡有关.研究表明,过氧化氢(H2O2)处理体外培养的细胞后可激活细胞内的黏着斑激酶(FAK)信号通路,从而影响细胞的增生与凋亡.研究FAK对氧化应激晶状体上皮细胞(LECs)的影响在年龄相关性白内障的预防方面有重要意义. 目的 研究H2O2对LECs中FAK表达的影响,探讨FAK对细胞的调控功能. 方法 用含质量分数10%胎牛血清的低糖DMEM培养液在体积分数5%CO2培养箱中常规培养人LECs株HLECs-B3,不含H2O2的为阴性对照组,在含不同浓度(30、50、70、100、300、500、700、1000 μmol/L)H2O2的培养基作用24 h,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率;对细胞进行FITC免疫荧光染色,荧光显微镜下观察各组细胞的形态变化及细胞内FAK的表达分布;观察Hoeehst33258染色的细胞核,评估各组细胞的凋亡情况;采用Western blot法技术半定量检测各组细胞内FAK蛋白的表达量及其磷酸化水平. 结果 对照组,30、50、70、100、300、500、700、1000 μmol/L H2O2组HLECs-B3细胞的存活率分别为(1.00±0.03)%、(1.24±0.03)%、(1.36±0.24)%、(0.93±0.02)%、(1.75±0.19)%、(1.37±0.18)%、(0.64±0.01)%、(0.59±0.11)%、(0.14±0.05)%,各组间细胞存活率的差异有统计学意义(F=9

作者:黄煜;孟倩丽;郭海科

来源:中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 10期

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作者:
黄煜;孟倩丽;郭海科
来源:
中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 10期
标签:
氧化应激 过氧化氢 晶状体上皮细胞 黏着斑激酶 Oxidative stress Hydrogen peroxide Lens epithelial cell Focal adhesion kinase
背景 年龄相关性白内障的发生、发展与长期氧化应激导致的细胞凋亡有关.研究表明,过氧化氢(H2O2)处理体外培养的细胞后可激活细胞内的黏着斑激酶(FAK)信号通路,从而影响细胞的增生与凋亡.研究FAK对氧化应激晶状体上皮细胞(LECs)的影响在年龄相关性白内障的预防方面有重要意义. 目的 研究H2O2对LECs中FAK表达的影响,探讨FAK对细胞的调控功能. 方法 用含质量分数10%胎牛血清的低糖DMEM培养液在体积分数5%CO2培养箱中常规培养人LECs株HLECs-B3,不含H2O2的为阴性对照组,在含不同浓度(30、50、70、100、300、500、700、1000 μmol/L)H2O2的培养基作用24 h,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率;对细胞进行FITC免疫荧光染色,荧光显微镜下观察各组细胞的形态变化及细胞内FAK的表达分布;观察Hoeehst33258染色的细胞核,评估各组细胞的凋亡情况;采用Western blot法技术半定量检测各组细胞内FAK蛋白的表达量及其磷酸化水平. 结果 对照组,30、50、70、100、300、500、700、1000 μmol/L H2O2组HLECs-B3细胞的存活率分别为(1.00±0.03)%、(1.24±0.03)%、(1.36±0.24)%、(0.93±0.02)%、(1.75±0.19)%、(1.37±0.18)%、(0.64±0.01)%、(0.59±0.11)%、(0.14±0.05)%,各组间细胞存活率的差异有统计学意义(F=9