目的 探究DNA聚合酶η(POLH)对过氧化氢(H2 O2)诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的防御机制.方法 以年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织和H2 O2处理的晶状体上皮细胞系SRA01/04为研究对象,分别通过RT-PCR和免疫印迹实验验证POLH的表达并筛选H2 O2最佳作用浓度用于后续实验,将培养的SRA01/04细胞分为H2 O2组、H2 O2+HA组和H2 O2+OV-POLH组,采用RT-PCR和免疫印迹实验检测POLH mRNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测DNA氧化损伤标志物以及TUNEL实验检测细胞凋亡变化,免疫印迹实验检测细胞中BAX、BCL-2、Nrf2和Keap1蛋白表达.结果 RT-PCR结果显示,与透明晶状体前囊膜(1.00±0.22)相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组织中POLH mRNA相对表达量明显下降(0.38±0.62)(P<0.0001).RT-PCR和免疫印迹实验均显示,200μmol·L-1 H2O2处理的SRA01/04细胞中POLH表达量最低;TUNEL实验检测结果显示,200μmol·L-1 H2 O2处理后细胞的凋亡明显增加.RT-PCR和免疫印迹实验结果显示,与H2 O2组和H2 O2+HA组相比,H2 O2+OV-POLH组SRA01/04细胞中POLH表达量显著升高(P<0.0001).免疫荧光染色结果显示,与H2 O2+HA组相比,H2 O2+OV-POLH组细胞的γH2A染色明显下降.免疫印迹实验检测结果显示,与H2 O2组和H2 O2+HA组相比,H2 O2+O

作者：李鹏飞；王从玉；王思文；鲍思洁；孙诚浩；管怀进

来源：眼科新进展 2022 年 42卷 6期