目的 探究地塞米松(Dex)对脂多糖(LPS)诱导人视网膜色素上皮(HRPE)细胞炎症损伤及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路的影响.方法 体外培养ARPE-19细胞株,MMT法检测不同浓度Dex处理细胞24h、48 h、74 h对LPS诱导ARPE-19细胞存活率的影响,确定Dex最佳处理浓度和时间.ARPE细胞随机分为:正常对照组(NC组)、LPS组(5 mg·L-1 LPS)、Dex组(0.20mol·L-Dex)、Dex+ LPS组(0.20 mol·L-1 Dex+5 mg·L-1 LPS),RT-qPCR检测各组细胞肿瘤坏死因子-仅(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、NLRP3、Caspase-1 mRNA相对表达量,ELISA法测定TNF-α、IL-13、IL-6蛋白表达水平,Western blot检测NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平.结果 同一时间点,与NC组比较,LPS组ARPE-19细胞存活率均显著降低(均为P<0.05),且随着Dex浓度增加,细胞存活率呈先升高后下降的趋势;0.20 mol·L-1 Dex作用LPS诱导的ARPE-19细胞24h时细胞存活率为(90.77±5.73)%,接近NC组,因此选用0.20 mol·L-Dex作用24 h用于后续实验.NC组与Dex组间TNF-α、IL-1β、IL-6、NL-RP3、Caspase-1 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(均为P>0.05).与NC组、Dex组比较,LPS组、Dex+ LPS组TNF-α、IL-1β、IL-6、NLRP3、Caspase
作者:崔铮;靖鹏举;朱冬梅;王媛
来源:眼科新进展 2020 年 40卷 9期