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目的 探讨miR-218 在高浓度葡萄糖诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMECs)凋亡中的作用及其相关机制.方法 将rRMECs 分为对照组、高糖组、miR-218 阴性抑制组和miR-218 抑制组.对照组细胞用DMEM低糖培养基培养;高糖组在培养基中添加D-葡萄糖,终浓度为25 mmol·L-1;miR-218抑制组及miR-218阴性抑制组是在高糖组培养基的基础上,按照说明书操作,利用Lipo2000 将miR-218 抑制剂和阴性抑制剂转染rRMECs,共同孵育24 h.提取各组rRMECs 总RNA 并分析miR-218 含量,检测细胞活力,计算细胞凋亡率以及采用Western blot检测各组rRMECs Caspase-3 蛋白表达,利用SPSS 19.0 统计学软件对实验数据进行单因素方差分析并进行两两比较.结果 对照组、高糖组、miR-218 阴性抑制组、miR-218 抑制组miR-218 相对表达量分别为1.00±0.08、1.48±0.12、1.46±0.14、1.03±0.08;细胞活力分别为 100.0%、(72.3±7.5)%、(70.7±9.3)%及(98.4±9.4)%;与对照组相比,高糖组和miR-218 阴性抑制组的miR-218 相对表达量明显升高(均为P<0.05),miR-218抑制组的miR-218相对表达量较对照组变化不显著(P>0.05);高糖组和miR-218 阴性抑制组rRMECs 细胞活力与对照组相比均明显降低(均为P<0.05),m

作者:郭闯;刘学政

来源:眼科新进展 2021 年 41卷 2期

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作者:
郭闯;刘学政
来源:
眼科新进展 2021 年 41卷 2期
标签:
葡萄糖 大鼠视网膜微血管内皮细胞 miR-218 Caspase-3 细胞凋亡
目的 探讨miR-218 在高浓度葡萄糖诱导大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMECs)凋亡中的作用及其相关机制.方法 将rRMECs 分为对照组、高糖组、miR-218 阴性抑制组和miR-218 抑制组.对照组细胞用DMEM低糖培养基培养;高糖组在培养基中添加D-葡萄糖,终浓度为25 mmol·L-1;miR-218抑制组及miR-218阴性抑制组是在高糖组培养基的基础上,按照说明书操作,利用Lipo2000 将miR-218 抑制剂和阴性抑制剂转染rRMECs,共同孵育24 h.提取各组rRMECs 总RNA 并分析miR-218 含量,检测细胞活力,计算细胞凋亡率以及采用Western blot检测各组rRMECs Caspase-3 蛋白表达,利用SPSS 19.0 统计学软件对实验数据进行单因素方差分析并进行两两比较.结果 对照组、高糖组、miR-218 阴性抑制组、miR-218 抑制组miR-218 相对表达量分别为1.00±0.08、1.48±0.12、1.46±0.14、1.03±0.08;细胞活力分别为 100.0%、(72.3±7.5)%、(70.7±9.3)%及(98.4±9.4)%;与对照组相比,高糖组和miR-218 阴性抑制组的miR-218 相对表达量明显升高(均为P<0.05),miR-218抑制组的miR-218相对表达量较对照组变化不显著(P>0.05);高糖组和miR-218 阴性抑制组rRMECs 细胞活力与对照组相比均明显降低(均为P<0.05),m