目的 构建小鼠TGFBI基因的真核表达载体,为研究角膜营养不良的发病机制奠定基础.方法 提取BALB/cBy小鼠正常角膜组织总RNA,经反转录-PCR合成TGFBI cDNA,克隆入真核表达载体pcDNA3.1并测序验证.用不同剂量重组质粒pcDNA3.1-TGFBI转染NIH3T3细胞,通过SYBR荧光实时定量PCR和Western blot检测TGFBI在细胞中的表达.结果 测序结果 显示扩增到的TGFBI cDNA以正确序列和方式插入载体,实时定量PCR和Western blot结果 显示TGFBI在NIH3T3细胞中表达增强.结论 成功构建了小鼠TGFBI基因真核表达载体,并在细胞中进行表达,为进一步研究TGFBI在角膜内的生理、病理功能奠定基础.
作者：牛静宜；陈鹏；王晔；谢立信；王宜强
来源：眼科研究 2009 年 27卷 3期
