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背景 脂肪增生和炎症反应是甲状腺相关眼病(TAO)活动期的两大主要病理过程,美伐他汀被证明有抑制前脂肪细胞分化的作用.目的 观察美伐他汀对TAO来源眼眶前脂肪细胞分化的作用,及对环氧合酶-2(COX-2)与过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)表达的影响,探讨其对脂多糖(LPS)诱导炎症反应及TAO眼眶前脂肪细胞分化的调控作用.方法 从4例TAO患者眼眶减压术中获取眼眶球后脂肪组织,用组织块培养法体外培养TAO眼眶成纤维细胞,为观察美伐他汀对TAO炎症反应过程中COX-2的作用,将培养细胞分为5个组,A组用10000μg/L的LPS,B、C、D组采用1000 μg/L LPS分别联合5、10、20 μmol/L美伐他汀,E组不加任何干预药物作为对照,均作用8h.观察美伐他汀对眶脂肪细胞分化后的作用,将A组再亚分为A1~A6组,1000 μg/L LPS作用8h后,加入诱导液诱导各组细胞向脂肪细胞分化,A1组不加任何干预药物,A2、A3、A4组分别在分化全程中加入5、10、20 μmol/L美伐他汀,A5、A6组分别在分化的第4天与第8天加入10μmol/L美伐他汀直至分化结束.采用油红0染色法测定分化后脂肪细胞的相对含量,应用Western blot法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测成纤维细胞中COX-2和PPAR-γ蛋白及其mRNA的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中前

作者:易文殊;许雪亮

来源:中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 10期

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易文殊;许雪亮
来源:
中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 10期
标签:
甲状腺相关眼病 前脂肪细胞 成纤维细胞 脂多糖 过氧化物酶体增生物激活受体-γ 环氧合酶-2 Thyroid-associated ophthalmopathy Preadipocytes Fibroblast Lipopolysaccharide Peroxisome proliferator activated receptor-γ Cyclooxygenase-2
背景 脂肪增生和炎症反应是甲状腺相关眼病(TAO)活动期的两大主要病理过程,美伐他汀被证明有抑制前脂肪细胞分化的作用.目的 观察美伐他汀对TAO来源眼眶前脂肪细胞分化的作用,及对环氧合酶-2(COX-2)与过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)表达的影响,探讨其对脂多糖(LPS)诱导炎症反应及TAO眼眶前脂肪细胞分化的调控作用.方法 从4例TAO患者眼眶减压术中获取眼眶球后脂肪组织,用组织块培养法体外培养TAO眼眶成纤维细胞,为观察美伐他汀对TAO炎症反应过程中COX-2的作用,将培养细胞分为5个组,A组用10000μg/L的LPS,B、C、D组采用1000 μg/L LPS分别联合5、10、20 μmol/L美伐他汀,E组不加任何干预药物作为对照,均作用8h.观察美伐他汀对眶脂肪细胞分化后的作用,将A组再亚分为A1~A6组,1000 μg/L LPS作用8h后,加入诱导液诱导各组细胞向脂肪细胞分化,A1组不加任何干预药物,A2、A3、A4组分别在分化全程中加入5、10、20 μmol/L美伐他汀,A5、A6组分别在分化的第4天与第8天加入10μmol/L美伐他汀直至分化结束.采用油红0染色法测定分化后脂肪细胞的相对含量,应用Western blot法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测成纤维细胞中COX-2和PPAR-γ蛋白及其mRNA的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中前