背景 玻连蛋白是一种多功能糖蛋白.本研究组前期的动物实验表明,玻连蛋白在缺氧小鼠视网膜中表达明显增高,体外细胞实验表明高糖可以诱导人脐静脉内皮细胞人(UVECs)中玻连蛋白表达的增加.但目前尚未证实玻连蛋白在视网膜新生血管病变中的作用机制. 目的 观察玻连蛋白对高糖培养下人UVECs的细胞骨架结构、细胞迁移、细胞成管能力的影响. 方法 建立高糖培养的人UVECs体外模型,利用干扰RNA技术干扰玻连蛋白的表达.实验分为高糖组(含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养人UVECs)、阴性干扰组(对照用siRNA预干扰人UVECs后,再用含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养)和阳性干扰组(玻连蛋白siRNA预干扰人UVECs后,再用含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养),在各组中分别利用Western blot法检测玻连蛋白的表达量,免疫荧光细胞化学染色结合荧光显微镜观察人UVECs微丝骨架,划痕法观察人UVECs的迁移情况,Matrigel法检测人UVECs的成管能力.各组的总体差异比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用LSD-t检验. 结果 Western blot结果显示,0h时3个组间玻连蛋白表达量的差异无统计学意义(F=1.064,P＞0.05)；培养24 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白的表达量依次降低,差异有统计学意义(F=15.519,P＜0.05)；培养48 h
作者：王玉风；杨侠；董晓光
来源：中华实验眼科杂志 2013 年 31卷 1期
