背景 研究表明,微小RNA-184(miR-184)可能抑制血管内皮细胞的生物学功能,在眼科研究领域,研究miR-184对新生血管的抑制作用对角膜炎性病变、视网膜和脉络膜新生血管性病变的预防和治疗具有一定的意义. 目的 验证miR-184对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)生物学功能的影响,探讨其对体外新生血管形成的作用和机制.方法 体外培养HUVECs株,将对数生长期的细胞分为4个组.空白对照组细胞培养基中不添加脂质体和RNA分子;空白转染组仅添加脂质体,但无RNA分子;阴性对照组添加hsa-miR-184和脂质体;miR-184转染组添加hsa-miR-184 miRNA mimic和脂质体.采用MTT法检测各组HUVECs的增生值;采用Transwell小室法观察各组HUVECs的迁移数;构建HUVECs的体外三维培养体系,用Matrigel胶体外管腔形成实验观察各组HUVECs的体外形成管腔的数目. 结果 Cy3标记siR-RiboTM脂质体转染后阳性HUVECs呈红色荧光,转染剂浓度>100 nmol/L时荧光最强,阳性细胞数最多,为最优转染浓度.MiR-184转染组和阴性对照组HUVECs中miR-184的相对表达量分别为1 524.10±385.89和1.00±0.05,差异有统计学意义(t=-7.894,P<0.01).MiR-184转染组转染后48 h细胞吸光度(A490)值为0.50±0.04,转染后24 h迁移过膜的细胞数为(55.40±5.86)个/视野,分别少
作者:刘成刚;周善璧
来源:中华实验眼科杂志 2014 年 32卷 8期