背景 miRNAs是一类非编码的小分子RNA,对LECs的凋亡发挥调控作用,但miRNAs对年龄相关性白内障患者LECs中氧化损伤的生物学效应及其机制仍需进一步研究. 目的 探讨miR-204在体内及体外对年龄相关性白内障氧化损伤的作用及其机制.方法 收集20例年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜和20个正常供体眼晶状体前囊膜,采用实时荧光定量PCR法检测2个组晶状体前囊膜中miR-204的表达量.对人晶状体上皮细胞系HLE-B3进行培养,在细胞培养液中添加200 μmol/L H2O2建立LECs氧化损伤模型,然后将细胞分为模型对照组、miR-204拟似物组、拟似物对照组、miR-204拮抗物组、拮抗物对照组,分别在细胞培养液中添加相应的转染剂,未用H202处理的LECs作为正常对照组.转染后24 h采用实时定量PCR法测定各组LECs中miR-204 mRNA的表达以验证转染率;采用流式细胞仪测定体外各组细胞的凋亡率;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测LECs中TP53INP1及p53 mRNA和蛋白的相对表达量. 结果 年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜中miR-204 mRNA相对表达量明显低于正常人,差异有统计学意义(t=14.21,P<0.05).正常对照组、模型对照组、miR-204拟似物组、拟似物对照组、miR-204拮抗物组、拮抗物对照组细胞凋亡率分别为1.31±0.12、4.90±0.28、2.60±
作者:苏现华;王晔;黄钰森
来源:中华实验眼科杂志 2016 年 34卷 3期