目的:建立一种基于流式细胞术快速定量分析小鼠角膜组织中嗜中性粒细胞的技术和方法。方法:选取6～8周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠15只，使用高尔夫样刀机械性刮除小鼠角膜上皮细胞层，生成直径2 mm的创面，在创伤后18 h切除带有完整角膜缘的小鼠角膜，采用胶原酶I和DNA酶联合消化法获得单细胞悬液，采用FACSCanto流式细胞分析仪画门技术分选角膜细胞中嗜中性粒细胞的数量。另取6只小鼠，应用随机数字表法分为创伤组和正常组，每组3只，使用抗CD45、Ly6G和CD11b荧光抗体进行角膜细胞染色，计数并比较未创伤和创伤角膜中嗜中性粒细胞的数量变化。结果:建立流式细胞仪检测角膜组织中嗜中性粒细胞的分析流程。CD45
＋细胞占角膜组织所有细胞的比例为(20.93±1.72)
作者：薛芸霞；刘俊；李志杰
来源：中华实验眼科杂志 2021 年 39卷 2期
