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目的 建立流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)表达.方法 方法学建立.采集研究对象乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血,应用PE标记抗碱性磷酸酶单克隆抗体,建立流式细胞术检测外周血mNAP表达方法.运用BD公司QuantiBRITETM PE于流式细胞术评估每个细胞结合的抗体数(AB/c),间接反映待测细胞mNAP的表达量.观察肝素、乙二胺四乙酸二钾、柠檬酸钠3种抗凝剂、标本放置温度、时间以及血浆中碱性磷酸酶对结果的影响,评价方法精密度.用所建方法检测481名健康人群外周血mNAP表达水平,对数据进行正态性检验,确立临床参考区间.检测84例重症感染和局部感染患者和39例病毒感染患者外周血mNAP表达水平.结果 标本检测前,应用磷酸盐缓冲液洗涤可以有效消除血浆中碱性磷酸酶(ALP)干扰.3种不同抗凝剂采集的标本对mNAP检测结果无影响.标本放置室温或4℃12 h内对检测结果无影响.精密度实验结果,批内变异系数(CV) 2.01% ~3.33%,平均CV 2.67%;批间CV 5.80% ~6.00%,平均CV5.90%.健康成年人无论男女,mNAP表达水平均呈非正态分布.男、女中位数(P25,P75)分别为1 758(1 378 ~2 310) AB/c、1 897(1 369 ~3 249) AB/c,性别之间差异无统计学意义(U=27 140,P=0.243 8).以2.5% ~97.5%位数作为临床参考区间,结果为92

作者:张欢欢;张春燕;杨晋;郑萍;赵绍林;吴惠毅

来源:中华检验医学杂志 2014 年 37卷 8期

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作者:
张欢欢;张春燕;杨晋;郑萍;赵绍林;吴惠毅
来源:
中华检验医学杂志 2014 年 37卷 8期
标签:
中性白细胞 细胞膜 碱性磷酸酶 流式细胞术 感染 Neutrophils Cell membrane Alkaline phosphatase Flow cytometry Infection
目的 建立流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)表达.方法 方法学建立.采集研究对象乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血,应用PE标记抗碱性磷酸酶单克隆抗体,建立流式细胞术检测外周血mNAP表达方法.运用BD公司QuantiBRITETM PE于流式细胞术评估每个细胞结合的抗体数(AB/c),间接反映待测细胞mNAP的表达量.观察肝素、乙二胺四乙酸二钾、柠檬酸钠3种抗凝剂、标本放置温度、时间以及血浆中碱性磷酸酶对结果的影响,评价方法精密度.用所建方法检测481名健康人群外周血mNAP表达水平,对数据进行正态性检验,确立临床参考区间.检测84例重症感染和局部感染患者和39例病毒感染患者外周血mNAP表达水平.结果 标本检测前,应用磷酸盐缓冲液洗涤可以有效消除血浆中碱性磷酸酶(ALP)干扰.3种不同抗凝剂采集的标本对mNAP检测结果无影响.标本放置室温或4℃12 h内对检测结果无影响.精密度实验结果,批内变异系数(CV) 2.01% ~3.33%,平均CV 2.67%;批间CV 5.80% ~6.00%,平均CV5.90%.健康成年人无论男女,mNAP表达水平均呈非正态分布.男、女中位数(P25,P75)分别为1 758(1 378 ~2 310) AB/c、1 897(1 369 ~3 249) AB/c,性别之间差异无统计学意义(U=27 140,P=0.243 8).以2.5% ~97.5%位数作为临床参考区间,结果为92