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目的:通过实验研究考察肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与冬凌草甲素联合使用时对脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1A细胞和C918细胞的抑制作用.方法:实验研究.以体外培养OCM-1A细胞和C918细胞为研究对象,加入不同浓度的冬凌草甲素(终浓度分别为0.625、1.25、2.5、5、10、20 μmol/L)和TRAIL(终浓度分别为6.25、12.5、25、50、100、200 ng/ml),利用MTT法检测细胞增殖活性,用PI单染结合流式细胞技术检测细胞周期分布,Annexin-V/PI双染检测细胞凋亡,用免疫印迹检测凋亡相关蛋白如死亡受体DR5、A-Caspase-3蛋白、XIAP蛋白表达量变化.数据采用单因素方差分析和独立样本t检验进行分析.结果:TRAIL单独使用时,对OCM-1A细胞有一定程度的抑制,TRAIL浓度为200 ng/ml时抑制率最高为36.5%;冬凌草甲素单独作用时,对OCM-1A细胞的抑制不明显;当二者联合使用时,对OCM-1A的抑制作用明显增强,TRAIL 200 ng/ml联合冬凌草甲素20μmol/L作用于OCM-1A时抑制作用最强,抑制率为87%,而对C918的抑制增强效果不明显.流式细胞仪检测结果发现处于G2期细胞显著增多,提示细胞被阻滞在G2/M期,免疫印迹结果显示DR5、A-Caspase-3表达增强,而凋亡抑制蛋白XIAP表达减弱.TRAIL与冬凌草甲素联合使用后对C918细胞的诱导凋亡作用不明显,差异没有

作者:查桂平;陆勤康;陈剑英;赖晓明

来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2019 年 21卷 1期

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作者:
查桂平;陆勤康;陈剑英;赖晓明
来源:
中华眼视光学与视觉科学杂志 2019 年 21卷 1期
标签:
TRAIL 冬凌草甲素 凋亡 脉络膜黑色素瘤 tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand oridonin apoptosis choroidal melanoma
目的:通过实验研究考察肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与冬凌草甲素联合使用时对脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1A细胞和C918细胞的抑制作用.方法:实验研究.以体外培养OCM-1A细胞和C918细胞为研究对象,加入不同浓度的冬凌草甲素(终浓度分别为0.625、1.25、2.5、5、10、20 μmol/L)和TRAIL(终浓度分别为6.25、12.5、25、50、100、200 ng/ml),利用MTT法检测细胞增殖活性,用PI单染结合流式细胞技术检测细胞周期分布,Annexin-V/PI双染检测细胞凋亡,用免疫印迹检测凋亡相关蛋白如死亡受体DR5、A-Caspase-3蛋白、XIAP蛋白表达量变化.数据采用单因素方差分析和独立样本t检验进行分析.结果:TRAIL单独使用时,对OCM-1A细胞有一定程度的抑制,TRAIL浓度为200 ng/ml时抑制率最高为36.5%;冬凌草甲素单独作用时,对OCM-1A细胞的抑制不明显;当二者联合使用时,对OCM-1A的抑制作用明显增强,TRAIL 200 ng/ml联合冬凌草甲素20μmol/L作用于OCM-1A时抑制作用最强,抑制率为87%,而对C918的抑制增强效果不明显.流式细胞仪检测结果发现处于G2期细胞显著增多,提示细胞被阻滞在G2/M期,免疫印迹结果显示DR5、A-Caspase-3表达增强,而凋亡抑制蛋白XIAP表达减弱.TRAIL与冬凌草甲素联合使用后对C918细胞的诱导凋亡作用不明显,差异没有