目的::探究高糖诱导体外培养的视网膜Müller细胞自噬及凋亡的变化。方法::实验研究。将体外培养的SD大鼠视网膜Müller细胞根据不同糖浓度分为5.5 mmol/L葡萄糖组(正常组)及20、30、40、50 mmol/L高糖组,并对40 mmol/L高糖处理Müller细胞组采用不同时间3、6、12、24、36 h进行培养。使用蛋白免疫印迹法及细胞免疫荧光检测自噬指标LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、自噬信号通路P62、Beclin-1蛋白表达及细胞定位;使用透射电镜及GFP-LC3慢病毒转染观察自噬小体的形成情况;使用TUNEL实验检测细胞凋亡状态。不同组别间数据比较采用单因素方差分析。结果::正常组及20、30、40、50 mmol/L高糖组中Müller细胞质的Beclin-1、P62及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白相对表达量总体比较,差异均有统计学意义(
F=131.21,
P=0.029;
F=197.25,
P=0.012;
F=100.02,
P=0.045),其中与正常组比较各浓度高糖组Müller细胞质内Beclin-1、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白均明显降低(
P<0.05),P62蛋白相对表达量明显增加(
P<0.001)。正常组以及6、12、24、36 h高糖组中Müller细胞质的Beclin-1、P62及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白相对表达量总体比较,差异均有统计学意义(
F=98.46,
P=0.015;
F=
作者:王立;颜世传;牛兰俊;朱曼辉;孙晓东;徐迅;宋鄂
来源:中华眼视光学与视觉科学杂志 2022 年 24卷 1期