胸腺素α1(thymosin alpha 1, Tα1)作为一种免疫增强剂,临床用途广泛。为了大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成Tα1基因,克隆于pUC19的EcoRI和PstI位点,经测序证明序列正确后,串联为4串体(Tα1④),经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRI和PstI位点,转化大肠杆菌TOP10菌种,酶切鉴定证明正确后,经1mmol/L IPTG诱导4h,获得硫氧还蛋白与Tα1④的融合表达,并经Western blot分析证实。用离子交换柱层析可纯化出硫氧还蛋白与Tα1④的融合蛋白,利用3H-TdR掺入法证实,该融合蛋白具有刺激小鼠脾淋巴细胞的活性。
作者:赵永同;石继红;赵宁;王俊楼;颜真;韩苇;张英起
来源:药物生物技术 2001 年 8卷 2期