构建了人乙酰肝素酶基因系列真核表达载体,并在NIH3T3细胞中表达,以研究乙酰肝素酶的结构与功能的关系.采用PCR及Gene SOE的方法从人乙酰肝素酶cDNA中扩增得到hpaFL(Met1-Ile543),hpa109(Met1-Glu109)及hpasp50(pro,Met1-Ala35+Lys158-Ile543),然后插入真核表达载体pcDNA 3.1中.采用脂质体介导法将其转染NIH3T3细胞,48h后RT-PCR检测转染细胞中外源乙酰肝素酶基因的转录.结果:酶切鉴定、测序结果以及RT-PCR分析结果表明成功构建了重组表达载体pcDNA-hpaFL,pcDNA-hpa109及pcD-NA-hpasp50,并在NIH3T3细胞中有效转录.构建成功的乙酰肝素酶系列表达载体可为乙酰肝素酶结构与功能关系的研究奠定基础.
作者：瞿小婷；赵华军；奚涛；侯永泰
来源：药物生物技术 2004 年 11卷 1期
