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目的:在真核细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株.方法:构建包含人乙酰肝素酶全长编码序列的真核表达载体pcDNA-hpaFL,转染CHO-K1细胞,G418筛选稳定表达细胞株.通过RT-PCR,Western-blot分析与鉴定蛋白的表达;用荧光HPLC法检测蛋白的活性.结果:在CHO-K1细胞中成功地表达出有活性的人乙酰肝素酶,并获得该酶的稳定表达细胞株.结论:成功地建立了人乙酰肝素酶稳定表达细胞株,为其抑制剂的筛选及其功能的研究奠定了基础.

作者:瞿小婷;赵华军;张中华;侯永泰;奚涛

来源:中国药科大学学报 2006 年 37卷 1期

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作者:
瞿小婷;赵华军;张中华;侯永泰;奚涛
来源:
中国药科大学学报 2006 年 37卷 1期
标签:
乙酰肝素酶 肿瘤转移 稳定表达
目的:在真核细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株.方法:构建包含人乙酰肝素酶全长编码序列的真核表达载体pcDNA-hpaFL,转染CHO-K1细胞,G418筛选稳定表达细胞株.通过RT-PCR,Western-blot分析与鉴定蛋白的表达;用荧光HPLC法检测蛋白的活性.结果:在CHO-K1细胞中成功地表达出有活性的人乙酰肝素酶,并获得该酶的稳定表达细胞株.结论:成功地建立了人乙酰肝素酶稳定表达细胞株,为其抑制剂的筛选及其功能的研究奠定了基础.