用正交试验法对硫酸锌诱导的兔肝锌-金属硫蛋白(zn-MT)的提取工艺进行优选,以原子吸收法测得锌提取量和差示紫外分光光度法测得巯基活性为评价指标,选用L9(34)正交表进行正交实验.考察影响提取Zn-MT的四个因素分别为:pH值8.6的Tris-HCl缓冲溶液浓度、温度、用量和-20℃预冷乙醇-氯仿(1:0.08)混合液与缓冲溶液体积比.所得最佳方案为:每克兔肝加3 ml 80℃,pH值8.6的0.05 mol/L TrisHCl缓冲溶液,匀浆,再按每克兔肝加2 ml乙醇-氯仿(1:0.08)混合液,摇匀,提取.最佳方案所得提取液经凝胶色谱法初步分离得Zn-MT收率约为4.2 mg/g肝.
作者:彭新君;徐丽霞;刘平安;吴萍
来源:药物生物技术 2004 年 11卷 2期