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目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)促进胰腺癌细胞SW1990、PaTu8988和BxPC3凋亡的机制.方法 将携带TRAIL基因的pCA13质粒分别转染胰腺癌SW1990、PaTu8988和BxPC3细胞(pCA13-TRAIL组),以空质粒转染作为对照组(pCA13组).采用RT-PCR及蛋白质免疫印迹法检测转染细胞TRAIL mRNA和蛋白的表达.流式细胞仪检测转染细胞的凋亡率和TRAIL受体R1、R2的表达,TUNEL和Hoechst双染色法及透射电镜观察细胞凋亡,免疫组织化学法检测转染细胞caspase-3蛋白的表达.结果 SW1990、PaTu8988和BxPC3细胞转染pCA13-TRAIL 24 h即有TRAIL mRNA和蛋白的表达;转染后24 h细胞的凋亡率分别为(27.30±5.14)%、(13.52±0.95)%和(31.40±8.70)%,均显著高于相应pCA13组的(10.58±1.88)%、(8.42±0.46)%和(16.11±1.66)%;转染后48 h TRAIL-R1阳性表达率分别为(61.37±3.05)%、(42.10±5.11)%和(36.64±4.84)%,TRAIL-R2阳性表达率分别为(36.20±4.83)%、(37.26±8.46)%和(24.32±3.71)%,除PaTu8988细胞,均显著高于相应的pCA13组;caspase-3阳性率分别为(14.64±5.35)%、(9.92±5.50)%和(16.12±6.74)%,显著高于pCA13组的(3.01±1.50)%、(1.75±0.50)% 和(3.79±1.58)%,差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论 TRAIL

作者:朱颖;汤玉茗;黄佳;李为光;章永平;王建承;张学军;姚玮艳

来源:中华胰腺病杂志 2019 年 19卷 3期

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作者:
朱颖;汤玉茗;黄佳;李为光;章永平;王建承;张学军;姚玮艳
来源:
中华胰腺病杂志 2019 年 19卷 3期
标签:
胰腺肿瘤 受体,TNF相关凋亡诱导配体 细胞凋亡 Pancreatic neoplasms Receptors TNF-related apoptosis-inducing ligand Apoptosis
目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)促进胰腺癌细胞SW1990、PaTu8988和BxPC3凋亡的机制.方法 将携带TRAIL基因的pCA13质粒分别转染胰腺癌SW1990、PaTu8988和BxPC3细胞(pCA13-TRAIL组),以空质粒转染作为对照组(pCA13组).采用RT-PCR及蛋白质免疫印迹法检测转染细胞TRAIL mRNA和蛋白的表达.流式细胞仪检测转染细胞的凋亡率和TRAIL受体R1、R2的表达,TUNEL和Hoechst双染色法及透射电镜观察细胞凋亡,免疫组织化学法检测转染细胞caspase-3蛋白的表达.结果 SW1990、PaTu8988和BxPC3细胞转染pCA13-TRAIL 24 h即有TRAIL mRNA和蛋白的表达;转染后24 h细胞的凋亡率分别为(27.30±5.14)%、(13.52±0.95)%和(31.40±8.70)%,均显著高于相应pCA13组的(10.58±1.88)%、(8.42±0.46)%和(16.11±1.66)%;转染后48 h TRAIL-R1阳性表达率分别为(61.37±3.05)%、(42.10±5.11)%和(36.64±4.84)%,TRAIL-R2阳性表达率分别为(36.20±4.83)%、(37.26±8.46)%和(24.32±3.71)%,除PaTu8988细胞,均显著高于相应的pCA13组;caspase-3阳性率分别为(14.64±5.35)%、(9.92±5.50)%和(16.12±6.74)%,显著高于pCA13组的(3.01±1.50)%、(1.75±0.50)% 和(3.79±1.58)%,差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论 TRAIL