目的:观察氧化苦参碱(OM)对过氧化氢(H
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2)处理的大鼠胰腺腺泡AR42J细胞株高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达和释放的影响。
方法:应用MTT法检测不同浓度H
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2处理对AR42J细胞生存率的影响。将体外培养的AR42J细胞分为对照组、H
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2组、H
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2+OM组。H
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2组及H
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2+OM组加入等容积的H
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2(终浓度0.16 mmol/L),对照组加入等容积三蒸水,H
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2+OM组在加入H
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2前0.5 h加入OM(终浓度0.5 g/L),培养24 h后收取细胞及细胞上清液。采用蛋白免疫印迹法检测细胞HMGB1蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液HMGB1蛋白水平,免疫荧光法检测HMGB1蛋白在细胞内的定位分布。
结果:H
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2组细胞HMGB1蛋白表达量、分泌到细胞上清液中HMGB1蛋白量、细胞质HMGB1蛋白占细胞总HMGB1蛋白的比例均显著高于对照组[1.04±0.04比0.69±0.02,(4.84±0.13)μg/L比(2.68±0.07)μg/L,(35.7±2.5)
作者:李仁礼;向晓辉;周子栋;张文成;夏时海
来源:中华胰腺病杂志 2020 年 20卷 1期