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目的 研究泽漆对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞的作用及其作用机制.方法 用MTT法检测细胞活力;用荧光显微镜法测定MDA-MB-231细胞的活性氧(ROS)生成量;用流式细胞仪检测细胞的凋亡率;用TUNEL检测法检测细胞凋亡DNA碎片;用Western blot检测caspase-9、caspase-3、PARP等凋亡相关因子的水平变化.结果 MTT试验显示泽漆提取物对MDA-MB-231细胞具有显著的抑制作用,但作用可被ROS抑制剂NAC及caspase抑制剂Z-VAD-FMK所消除;荧光显微镜检测显示泽漆提取物能显著提高ROS的生成;流式细胞仪检测显示泽漆提取物处理后,PI染色阳性细胞明显增加,但被NAC减弱.Caspase-9、caspase-3在提取物处理后均转为激活形式,PARP被剪切.TUNEL法显示,提取物处理后细胞凋亡碎片明显增多,而提前加入ROS抑制剂NAC和caspase抑制剂Z-VAD-FMK能使泽漆提取物诱导凋亡的DNA碎片明显减少.结论 泽漆乙酸乙酯提取物可以有效抑制MDA-MB-231细胞的生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与ROS过量生成所致的线粒体损伤途径有关.

作者:王筱婧;王东兴;范洁;高越;张海

来源:药学实践杂志 2017 年 35卷 4期

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作者:
王筱婧;王东兴;范洁;高越;张海
来源:
药学实践杂志 2017 年 35卷 4期
标签:
泽漆 MDA-MB-231细胞 三阴乳腺癌 ROS 线粒体途径 细胞凋亡 Euphorbia helioscopia MDA-MB-231 cells triple-negative breast cancer ROS mitochondrial pathway apoptosis
目的 研究泽漆对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞的作用及其作用机制.方法 用MTT法检测细胞活力;用荧光显微镜法测定MDA-MB-231细胞的活性氧(ROS)生成量;用流式细胞仪检测细胞的凋亡率;用TUNEL检测法检测细胞凋亡DNA碎片;用Western blot检测caspase-9、caspase-3、PARP等凋亡相关因子的水平变化.结果 MTT试验显示泽漆提取物对MDA-MB-231细胞具有显著的抑制作用,但作用可被ROS抑制剂NAC及caspase抑制剂Z-VAD-FMK所消除;荧光显微镜检测显示泽漆提取物能显著提高ROS的生成;流式细胞仪检测显示泽漆提取物处理后,PI染色阳性细胞明显增加,但被NAC减弱.Caspase-9、caspase-3在提取物处理后均转为激活形式,PARP被剪切.TUNEL法显示,提取物处理后细胞凋亡碎片明显增多,而提前加入ROS抑制剂NAC和caspase抑制剂Z-VAD-FMK能使泽漆提取物诱导凋亡的DNA碎片明显减少.结论 泽漆乙酸乙酯提取物可以有效抑制MDA-MB-231细胞的生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与ROS过量生成所致的线粒体损伤途径有关.