目的:克隆及表达特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段. 方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL-60提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出PRAME 基因cDNA片段.将PRAME基因cDNA片段插入载体pGEM-T-easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX-4T-2中,构建高效表达克隆,并转化大肠杆菌进行表达. 结果:1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5 h,PRAME蛋白表达即达高峰. 结论:PRAME基因在极少数正常组织中低表达,而在白血病患者高表达,并编码被自体细胞毒T淋巴细胞识别的抗原,所以该基因有望成为肿瘤免疫治疗的新成员.
作者：王莉；郭爱林；秦叔逵；李青；王琳
来源：医学研究生学报 2005 年 18卷 4期
