目的：人类白细胞抗原-G（HLA-G）通过与树突状细胞（DC）表面的免疫球蛋白样转录体（ILT2）和 ILT4（ CD85d）结合，广泛参与机体的免疫耐受的过程。探讨经HLA-G重组腺病毒载体感染后的恒河猴未成熟树突状细胞刺激T细胞的增殖作用。方法麻醉恒河猴获取新鲜骨髓血，采用密度梯度离心法，分离获得的单个核细胞行免疫磁珠法获得CD34＋细胞。添加小剂量细胞因子联合诱导分化CD34＋细胞，从而获得树突状细胞。介导HLA-G的重组腺病毒经过转染未成熟树突状细胞后，检测病毒感染效率，Western blot检测HLA-G在未成熟树突状细胞中的表达。以恒河猴T细胞作为反应细胞，将介导HLA-G的重组腺病毒转染的不同状态下的DC为刺激细胞，进行混合淋巴细胞实验。设置5组：即成熟树突状细胞组（ mDC组）；未成熟树突状细胞组（ imDC组）；imDC（ L）组：在第7天成功获得imDC后加入脂多糖100 ng／mL；imDC（ V）组：重组腺病毒介导HLA-G感染的imDC，方法同前；imDC（ L＋V）组：重组腺病毒同样转染imDC，同时在培养过程中添加100 ng／mL的脂多糖。根据DC与T细胞不同比例（1∶5、1∶10、1∶20、1∶40）计算各组刺激指数（SI）。结果成功培养获得恒河猴未成熟树突状细胞，HLA-G在该细胞中表达。流式细胞术检测结果发现DC的纯度高
作者：陈哲；胡明道；田大广；魏晓平；于恒海；陈鹏
来源：医学研究生学报 2017 年 30卷 1期
