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目的 最新研究发现转录因子EB(TFEB)在调节自噬减少细胞内脂质,抑制动脉粥样硬化上起着重要作用.文中旨在探索阿托伐他汀(ATV)通过激活TFEB对泡沫细胞自噬及胆固醇含量的影响.方法 体外培养人单核细胞株THP-1,使用佛波酯诱导分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL),诱导48 h建立泡沫细胞模型.实验分为空白组、oxLDL组、oxLDL+氯喹组、oxLDL+ATV组、oxLDL+氯喹+ATV组.各组细胞均加入药物处理48 h,采用CCK8法检测ATV及氯喹对细胞的毒性;油红0染色观察细胞内脂滴的含量;采用氧化酶法检测细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)等含量;胆固醇外流荧光分析法分析测定细胞胆固醇外流率;Western blot检测LC3II/I、P62、TFEB、LAMP 1蛋白的表达情况.结果 oxLDL+氯喹组细胞内脂滴较oxLDL组、oxLDL+氯喹+ATV组明显增加(P<0.05),而oxLDL+ATV组较oxLDL组明显降低(P<0.05).oxLDL+ATV组、空白组细胞内FC、TC、CE、CE/TC含量较oxLDL组明显降低(P<0.05);oxLDL+氯喹+ATV组细胞内FC、TC、CE及CE/TC含量(0.063±0.006、0.124±0.009、0.056± 0.007及0.496± 0.039)较oxLDL+氯喹组(0.076± 0.004、0.179± 0.005、0.103±0.008及0.576±0.032)明显降低(P<0.05);oxLDL+氯喹组 FC、TC、CE、CE/TC含量较 oxLDL组明显升高(P<0.

作者:张伟;陈雨露;黄维义;杜延飞;涂婷;郑舒展

来源:医学研究生学报 2020 年 33卷 4期

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作者:
张伟;陈雨露;黄维义;杜延飞;涂婷;郑舒展
来源:
医学研究生学报 2020 年 33卷 4期
标签:
阿托伐他汀 转录因子EB 自噬 胆固醇 泡沫细胞
目的 最新研究发现转录因子EB(TFEB)在调节自噬减少细胞内脂质,抑制动脉粥样硬化上起着重要作用.文中旨在探索阿托伐他汀(ATV)通过激活TFEB对泡沫细胞自噬及胆固醇含量的影响.方法 体外培养人单核细胞株THP-1,使用佛波酯诱导分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL),诱导48 h建立泡沫细胞模型.实验分为空白组、oxLDL组、oxLDL+氯喹组、oxLDL+ATV组、oxLDL+氯喹+ATV组.各组细胞均加入药物处理48 h,采用CCK8法检测ATV及氯喹对细胞的毒性;油红0染色观察细胞内脂滴的含量;采用氧化酶法检测细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)等含量;胆固醇外流荧光分析法分析测定细胞胆固醇外流率;Western blot检测LC3II/I、P62、TFEB、LAMP 1蛋白的表达情况.结果 oxLDL+氯喹组细胞内脂滴较oxLDL组、oxLDL+氯喹+ATV组明显增加(P<0.05),而oxLDL+ATV组较oxLDL组明显降低(P<0.05).oxLDL+ATV组、空白组细胞内FC、TC、CE、CE/TC含量较oxLDL组明显降低(P<0.05);oxLDL+氯喹+ATV组细胞内FC、TC、CE及CE/TC含量(0.063±0.006、0.124±0.009、0.056± 0.007及0.496± 0.039)较oxLDL+氯喹组(0.076± 0.004、0.179± 0.005、0.103±0.008及0.576±0.032)明显降低(P<0.05);oxLDL+氯喹组 FC、TC、CE、CE/TC含量较 oxLDL组明显升高(P<0.