目的 比较人呼吸道合胞病毒(HRSV)的2种纯化方法.方法 HRSV经超滤浓缩后,分别采用蔗糖密度梯度离心法和Sepharose 4FF凝胶过滤层析法纯化.对纯化产物进行感染性效价、SDS-PAGE还原电泳分析及Western blot检测,并取目的 产物免疫ICR小鼠,检测免疫血清的中和抗体效价.结果 经还原电泳,蔗糖密度梯度离心和Sepharose 4FF凝胶过滤层析的纯化产物都在60～70kDa间呈现一主要条带,前者证实为HRSV特异性F蛋白;但在Sepharose 4FF凝胶过滤层析3个样品(第2峰)中检测出目的 病毒,感染性效价分别为4.50、4.25和6.25 lgCCID50/ml.两种方法 所得纯化产物免疫ICR小鼠均能诱导产生中和抗体,几何平均效价(GMT)为1:13.93～1:4.00.含铝佐剂组的抗体阳性率和中和抗体GMT分别是不含铝佐剂组的1.5～2.0倍和1.0～1.4倍.β-丙内酯灭活组的抗体阳性率和中和抗体GMT分别是甲醛灭活组的1.0～1.3倍和1.0～1.1倍.结论 蔗糖密度梯度离心法和Sepharose 4FF凝胶过滤层析法均能纯化出HRSV,后者效果更好、效率更高.加铝佐剂有助于提高抗体阳转率;β-丙内酯和甲醛2种灭活剂对免疫效果的影响差异不大.
作者：董莉娟；李华；蒋蕊鞠；杨蓉；龙润乡；白慧珠；崔萍芳；杨婷；谢忠平
来源：医学研究杂志 2011 年 40卷 4期
