目的 利用D-半乳糖诱导建立间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外衰老模型,并探讨其潜在机制.方法 以正常培养的MSCs做对照组,以分别用1、10、100g/L D-半乳糖诱导的MSCs作为处理组,培养48h后,采用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测细胞内AKT与mTOR蛋白磷酸化水平以及衰老相关蛋白p16Ink4a的变化.同时使用β-半乳糖苷酶试剂盒检测MSCs中β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)表达量的变化.最后用AKT抑制剂预处理D-半乳糖诱导组以明确AKT/mTOR信号通路在MSCs衰老中的作用.结果 与对照组相比,10g/L D-半乳糖作用48h后MSCs中β-半乳糖苷酶表达和衰老相关蛋白p16Ink4a含量明显增加,同时p-AKT与p-mTOR含量也较对照组增加,加入AKT抑制剂后,衰老组β-半乳糖苷酶表达和衰老相关蛋白p16Ink4a含量皆有所下降.结论 D-半乳糖能成功诱导构建MSCs体外衰老模型,AKT/mTOR信号通路参与了这一过程.
作者：杨孟恺；易诚青
来源：医学研究杂志 2018 年 47卷 7期
