目的 观察大鼠血清和血浆对大鼠成骨细胞的增殖和分化的影响.方法 取出生24h SD大鼠头颅骨,Ⅰ型胶原酶多次消化后获得成骨细胞,DMEM加10％FBS进行常规培养,同时细胞免疫荧光鉴定Col1a1的表达,传代后分别用10％血清(rat serum,RS)和10％血浆(rat plasma,RP)进行培养,分别命名为血清组和血浆组.培养24h,镜下观察细胞形态变化及检测增殖蛋白PCNA的表达;CCK8方法检测成骨细胞增殖.成骨诱导刺激1周后,检测(alkaline phosphatase,ALP)染色、ALP活性,同时定量PCR检测ALP、Runx2、Col1a1和OCN基因的表达.分化3周后,进行矿化结节染色.成骨细胞经过血清和血浆处理6h后,标记钙离子探针检测钙离子内流.结果 几乎所有的细胞均表达Ⅰ型胶原.血清组成骨细胞明显变得细长,失去成骨细胞原有的特征;大鼠血浆组的PCNA表达水平低于大鼠血清组,CCK8检测表明血清组细胞增殖速度高于血浆组细胞;大鼠血浆组碱性磷酸酶活性及染色显著强于大鼠血清组;成骨性基因ALP、Runx2、OCN和Col1 a1在大鼠血浆刺激下,表达明显高于血清组.大鼠血浆组的钙离子内流和矿化结节明显优于大鼠血清组.结论 大鼠血清刺激大鼠成骨细胞的增殖,在促进成骨分化方面的作用弱于大鼠血浆的作用.
作者：贺自克；王上增；薛艳；郑昱新；丁道芳
来源：医学研究杂志 2018 年 47卷 11期
