目的：鉴定已构建的干扰人核糖核酸酶抑制因子(hRI)的siRNA表达载体pKD-dsRI的干扰效果。方法用脂质体法将所构建的pKD-dsRI与充当报告基因的重组绿色荧光蛋白融合hRI的逆转录病毒载体(pLNCX-EGFP-C1-hri)共转染到人宫颈癌HeLa细胞中。实验设4组院空白细胞组(未转染组)、pLNCX-EGFP-C1-hri转染组(对照组1)、pKD+pLNCX-EGFP-C1-hri共转染组(对照组2)及pKD-dsRI+pLNCX-EGFP-C1-hri共转染组(干扰组)。采用RT-PCR和Western blotting检测egfp-hri基因在转录后基因水平和蛋白质水平的表达。结果干扰组egfp-hri基因的mRNA转录水平和蛋白表达水平较对照组1与对照组2分别下降了91
作者：李坤；丁宁；李琳
来源：中国医药导报 2014 年 25期
