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目的:鉴定NIH3T3细胞中绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子基因(egfp-hRI)的表达情况。方法:采用上清感染法,将产生绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子反转录病毒的PA317细胞上清感染NIH3T3细胞,使反转录病毒介导的绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子载体(pLNCX-EGFP-C1-hRI)稳定整合于NIH3T3细胞。用荧光显微镜检测目的基因的表达,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测目的基因在NIH3T3细胞的表达。结果:在荧光显微镜下可见绿色荧光在细胞浆内表达,Western blot法检测到目的基因表达。结论:建立表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的NIH3T3细胞株。

作者:李坤;丁宁

来源:中国医学装备 2014 年 10期

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作者:
李坤;丁宁
来源:
中国医学装备 2014 年 10期
标签:
人核糖核酸酶抑制因子 感染 绿色荧光蛋白 Human ribonuclease inhibitor Infection Enhanced green fluorescent protein
目的:鉴定NIH3T3细胞中绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子基因(egfp-hRI)的表达情况。方法:采用上清感染法,将产生绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子反转录病毒的PA317细胞上清感染NIH3T3细胞,使反转录病毒介导的绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子载体(pLNCX-EGFP-C1-hRI)稳定整合于NIH3T3细胞。用荧光显微镜检测目的基因的表达,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测目的基因在NIH3T3细胞的表达。结果:在荧光显微镜下可见绿色荧光在细胞浆内表达,Western blot法检测到目的基因表达。结论:建立表达绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子的NIH3T3细胞株。