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目的:探讨E3泛素连接酶(EDD)基因在SKOV3/DDP细胞顺铂耐药中的作用。方法采用RT-PCR和Western blot检测人卵巢癌SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞内EDD表达水平的差异。通过转染EDD-siRNA沉默EDD的表达后,噻唑蓝法检测顺铂对SKOV3/DDP细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI双染法检测顺铂对细胞凋亡的影响;Western blotting检测髓样细胞白血病-1(Mcl-1)和细胞周期检测点激酶2(CHK2)蛋白表达水平。结果 SKOV3细胞EDD的表达水平显著低于卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP (P<0.05)。 EDD-siRNA转染24 h后,EDD mRNA和蛋白表达水平均显著低于未转染组(P<0.05);SKOV3/DDP细胞IC50值显著降低(P<0.05),Mcl-1蛋白的表达受到抑制(P<0.05),而CHK2无明显变化(P>0.05)。结论 EDD-siRNA能沉默EDD基因,降低Mcl-1蛋白的表达水平,增强顺铂对SKOV3/DDP细胞的促凋亡作用,降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性,有效恢复SKOV3/DDP细胞顺铂敏感性。

作者:王小特;曹怡

来源:中国医药导报 2015 年 26期

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作者:
王小特;曹怡
来源:
中国医药导报 2015 年 26期
标签:
EDD 卵巢癌 顺铂耐药 细胞凋亡 EDD Ovarian cancer Cisplatin resistance Apoptosis
目的:探讨E3泛素连接酶(EDD)基因在SKOV3/DDP细胞顺铂耐药中的作用。方法采用RT-PCR和Western blot检测人卵巢癌SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞内EDD表达水平的差异。通过转染EDD-siRNA沉默EDD的表达后,噻唑蓝法检测顺铂对SKOV3/DDP细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI双染法检测顺铂对细胞凋亡的影响;Western blotting检测髓样细胞白血病-1(Mcl-1)和细胞周期检测点激酶2(CHK2)蛋白表达水平。结果 SKOV3细胞EDD的表达水平显著低于卵巢癌耐药细胞SKOV3/DDP (P<0.05)。 EDD-siRNA转染24 h后,EDD mRNA和蛋白表达水平均显著低于未转染组(P<0.05);SKOV3/DDP细胞IC50值显著降低(P<0.05),Mcl-1蛋白的表达受到抑制(P<0.05),而CHK2无明显变化(P>0.05)。结论 EDD-siRNA能沉默EDD基因,降低Mcl-1蛋白的表达水平,增强顺铂对SKOV3/DDP细胞的促凋亡作用,降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性,有效恢复SKOV3/DDP细胞顺铂敏感性。