目的 探讨利血平与大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RA-VSMC)自噬的关系.方法 用含利血平或者厄尔平衡盐缓冲液(EBSS)培养基体外培养RA-VSMC,MTT法检测对照组、5μmol/L利血平组、10μmol/L利血平组、20μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组RA-VSMC的细胞活力;mRFP-GFP-LC3双荧光体系示踪RA-VSMC的自噬小体;实时荧光定量PCR(qPCR)以及蛋白免疫印迹(WB)实验检测对照组、10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组RA-VSMC自噬相关基因LC3和Beclin1的表达.结果 MTT结果 显示,与对照组比较,5μmol/L利血平组、10μmol/L利血平组、20μmol/L利血平组和50μmol/L利血平组细胞活力均显著降低(P<0.05或P<0.01);mRFP-GFP-LC3双荧光体系结果 显示,对照组和10μmol/L利血平组细胞中无明显自噬小体,50μmol/L利血平组和EBSS组细胞形成明显自噬小体;qPCR结果 显示,与对照组比较,10μmol/L利血平组LC3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05),50μmol/L利血平组和EBSS组LC3 mRNA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01);10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组Beclin1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01);WB结果 显示,与对照组比较,10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率显著升高(P<0.01),10μmol/L利
作者:王顺民;杨晓丹;曾勇;黄露;雍苏南
来源:中国医药导报 2020 年 17卷 16期