:目的 探讨自噬对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移和增殖的影响。方法 采用体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用不同浓度AngⅡ(10—10 mol/L~10—6 mol/L)刺激VSMCs 24 h,免疫印迹检测细胞自噬标志物LC3、Beclin1的表达;采用最佳浓度AngⅡ(10—7 mol/L)对VSMCs 刺激不同时间点(0 h、0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h),同时检测LC3、Beclin1 表达。采用AngⅡ1 型受体阻断剂(洛沙坦钾)、AngⅡ型受体阻断剂(PD123319)进行预孵,之后采用最佳浓度AngⅡ刺激,检测LC3 表达。采用自噬特异性阻断剂3 MA 进行预孵,通过损伤愈合试验,CCK8 增殖试验检测细胞自噬在AngⅡ诱导的VSMCs 迁移和增殖的作用。结果 AngⅡ刺激可引起VSMCs发生自噬,表现为LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ、Beclin 1上调,且呈现明显时间、剂量效应(P < 0.05),10—7 mol /LAngⅡ 刺激24h自噬最强。AngⅡ 1型受体(AT1)阻滞剂(洛沙坦钾)能抑制AngⅡ 诱导VSMCs 的自噬(P < 0.05),而AngⅡ2 型受体(AT2R)阻滞剂(PD123319)不能抑制AngⅡ诱导VSMCs 自噬(P >0.05)。自噬特异性阻断剂3 MA 能抑制AngⅡ诱导VSMCs 的迁移和增殖。结论 AngⅡ可通过AT1R 诱导VSMCs 发生自噬,从而促进VSMCs 迁移和增殖。
作者:侯祥平;陈柳丹;林玉洁;陈克芳;麦华超;陈珂;李建军
来源:中西医结合心脑血管病杂志 2017 年 15卷 2期