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采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-T easy质粒中,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,分析基因,酶切后与含有乳酸乳球菌启动子NisA的pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养.用Nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物,并且用分光光度法测定工程菌表达的HO-1活性为0.45 nmol mg(protein)-1h-1.图5参18

作者:吴长毅;曾因明;王俊科;庞庆丰;杨光;高新跃

来源:应用与环境生物学报 2006 年 12卷 1期

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作者:
吴长毅;曾因明;王俊科;庞庆丰;杨光;高新跃
来源:
应用与环境生物学报 2006 年 12卷 1期
标签:
乳酸乳球菌 血红素加氧酶-1 基因克隆表达 Lactococcus lactis heme oxygenase-1 gene cloning and expression
采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-T easy质粒中,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,分析基因,酶切后与含有乳酸乳球菌启动子NisA的pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养.用Nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物,并且用分光光度法测定工程菌表达的HO-1活性为0.45 nmol mg(protein)-1h-1.图5参18