目的优化喜树胚轴细胞悬浮培养体系生产喜树碱.方法将由喜树种子下胚轴诱导的愈伤组织进行悬浮培养,研究了基本培养基、激素和培养条件对培养物生长的影响,测定了培养细胞生长和喜树碱积累的动态变化.结果悬浮培养细胞在MS培养基中细胞生长良好,细胞分散性和喜树碱积累优于在其他培养基中.最佳激素组合为2,4-D 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,细胞继代周期以12 d左右为宜,悬浮细胞适合在22~26℃,120 r/min下生长.悬浮培养细胞在第4~20天为对数生长期,细胞倍增时间为t(d)=3.92 d-1,细胞干重至第20天达到最大,为27.44 g/L.在细胞对数生长期内,喜树碱积累与细胞生长呈线形正相关性,第20天喜树碱质量分数达到最大值9.319×10-5,喜树碱产量为2.56 mg/L.结论 MS基本培养基适合喜树胚轴细胞悬浮培养,细胞生长前20天内,培养体系中喜树碱积累与细胞生长呈正线形相关性.
作者:潘学武;刘欣;吕应堂
来源:中草药 2005 年 36卷 8期