目的 考察小檗碱对Aβ25-35损伤的神经元的保护作用,并初步探讨其机制.方法 40μg/mL Aβ25-35作用原代培养大鼠脑皮层神经元36 h,复制阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)细胞模型,同时加入小檗碱进行干预,实验分为对照组、模型组、0.5μmol/L小檗碱组、2μmol/L小檗碱组.通过Hoechst33258染色观察神经元凋亡形态,Annexin V-FITC/PI 双标流式细胞术检测早期凋亡情况,Western blotting检测活化的Caspase-3蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR检测雷帕霉素靶(target of Rapamycin,mTOR)相关基因表达.结果 与对照组比较,AD细胞模型神经元凋亡明显增加.2 μmol/L小檗碱能显著减少Aβ损伤神经元早期凋亡(P<0.05),0.5、2μmol/L小檗碱均能抑制异常活化的Caspase-3蛋白表达.0.5、2μmol/L小檗碱显著下调了AD模型异常活化的mTOR mRNA和下游底物核糖体S6蛋白激酶(S6kinase,S6K)P70S6K mRNA的表达(P<0.05、0.01),同时显著上调了AD细胞模型真核细胞始动因子4E结合蛋白1(4E binding protein,4EBP1)mRNA 的表达(P<0.01).结论 小檗碱对Aβ25-35损伤的原代培养大鼠皮层神经元具有一定神经保护作用,其保护作用可能是通过抑制mTOR途径实现的.
作者：王静；张艳军；常亮堂
来源：中草药 2011 年 42卷 4期
