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目的 克隆国产沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis互作蛋白(jasmonate Zim-domain,JAZ)基因(NINJA),为深入研究其在沉香倍半萜合成途径中的功能奠定基础.方法 以白木香总RNA为模板,采用RACE法和RT-PCR方法,克隆白木香NINJA基因cDNA全长,并进行生物信息学的分析;采用实时荧光定量(qRT-PCR)方法分析经茉莉酸甲酯(MeJA)处理的白木香愈伤组织中AsNINJAJ基因的表达模式.结果 获得白木香NINJA基因全长cDNA,命名为As NINJA1.序列分析表明,该基因的序列全长为1 982 bp,包含一个l 221 bp的开放阅读框,编码406个氨基酸,蛋白质相对分子质量为43 697,等电点为6.02.qRT-PCR结果显示,经MeJA处理4h后AsNINJA1基因相对表达量最高,是对照(未经MeJA处理的白木香愈伤组织)的近100倍,随后显著下降.结论 获得AsNINJA1基因全长cDNA序列,该基因对MeJA诱导极为敏感,且能在伤害早期响应.

作者:廖永翠;徐艳红;张争;隋春;梁良;魏建和

来源:中草药 2014 年 45卷 20期

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作者:
廖永翠;徐艳红;张争;隋春;梁良;魏建和
来源:
中草药 2014 年 45卷 20期
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白木香 As NINJA1基因 cDNA快速末端扩增 序列分析 表达分析 茉莉酸甲酯 Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg AsNINJA1 gene rapid amplification of eDNA ends sequence analysis expression analysis MeJA
目的 克隆国产沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis互作蛋白(jasmonate Zim-domain,JAZ)基因(NINJA),为深入研究其在沉香倍半萜合成途径中的功能奠定基础.方法 以白木香总RNA为模板,采用RACE法和RT-PCR方法,克隆白木香NINJA基因cDNA全长,并进行生物信息学的分析;采用实时荧光定量(qRT-PCR)方法分析经茉莉酸甲酯(MeJA)处理的白木香愈伤组织中AsNINJAJ基因的表达模式.结果 获得白木香NINJA基因全长cDNA,命名为As NINJA1.序列分析表明,该基因的序列全长为1 982 bp,包含一个l 221 bp的开放阅读框,编码406个氨基酸,蛋白质相对分子质量为43 697,等电点为6.02.qRT-PCR结果显示,经MeJA处理4h后AsNINJA1基因相对表达量最高,是对照(未经MeJA处理的白木香愈伤组织)的近100倍,随后显著下降.结论 获得AsNINJA1基因全长cDNA序列,该基因对MeJA诱导极为敏感,且能在伤害早期响应.