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目的 获得雷公藤Tripterygium wilfordii磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase,PTEN)基因的cDNA全长,并预测其生物学功能.方法 根据雷公藤转录组数据设计引物,对雷公藤PTEN (TwPTEN)基因进行全长克隆;通过生物信息学方法对得到的TwPTEN基因进行分析,主要包括多重序列比对,蛋白结构预测和构建进化树分析等.结果 根据分析结果TwPTEN基因全长为2 247 bp,共编码614个氨基酸,等电点为5.84,相对分子质量为66 900,多重序列比对显示其与其他植物的PTEN基因具有较高的同源性.雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后,实时荧光定量结果显示,TwPTEN的表达量明显增加,并在12h达到最高,提示PTEN基因与植物的次生代谢产物的产生有关.结论 本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到PTEN基因,为进一步研究TwPTEN基因的功能奠定基础.

作者:周家伟;刘雨佳;胡添源;高伟;黄璐琦

来源:中草药 2017 年 48卷 7期

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作者:
周家伟;刘雨佳;胡添源;高伟;黄璐琦
来源:
中草药 2017 年 48卷 7期
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雷公藤 磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶 克隆 生物信息学分析 表达分析 Tripterygium wilfordii Hook.f. PTEN clone bioinformatics analysis expression analysis
目的 获得雷公藤Tripterygium wilfordii磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇3-磷酸酶(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase,PTEN)基因的cDNA全长,并预测其生物学功能.方法 根据雷公藤转录组数据设计引物,对雷公藤PTEN (TwPTEN)基因进行全长克隆;通过生物信息学方法对得到的TwPTEN基因进行分析,主要包括多重序列比对,蛋白结构预测和构建进化树分析等.结果 根据分析结果TwPTEN基因全长为2 247 bp,共编码614个氨基酸,等电点为5.84,相对分子质量为66 900,多重序列比对显示其与其他植物的PTEN基因具有较高的同源性.雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后,实时荧光定量结果显示,TwPTEN的表达量明显增加,并在12h达到最高,提示PTEN基因与植物的次生代谢产物的产生有关.结论 本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到PTEN基因,为进一步研究TwPTEN基因的功能奠定基础.