目的 研究迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响,并探究相关机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度迷迭香酸作用不同时间后HCT-8细胞的增殖情况;根据CCK-8法结果确定迷迭香酸15、45、75 μmol/L作用72 h,考察HCT-8细胞的凋亡和相关基因及蛋白的表达;通过流式细胞术检测HCT-8细胞的凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测p53、Bax和Puma基因的mRNA表达;通过Western blotting法检测p53、Bax、Puma和active Caspase-9的蛋白表达水平.结果 迷迭香酸能够抑制HCT-8细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性.15、45 μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞早期凋亡(P<0.01),75 μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞晚期凋亡(P<0.01).迷迭香酸可以使Puma的mRNA表达上调,并呈浓度依赖性;45、75 μmol/L的迷迭香酸可以使p53和Bax的mRNA表达升高(P<0.05).迷迭香酸可以上调Puma、Bax和active Caspase-9的蛋白表达水平,并呈浓度依赖性;75 μmol/L的迷迭香酸可以使p53的蛋白表达明显升高(P<0.05).结论 迷迭香酸对HCT-8细胞具有明显的增殖抑制作用,并且是通过诱导凋亡实现的,促凋亡蛋白p53、Puma、Bax和active Caspase-9诱导了凋亡的发生.
作者:娄诤;陆仲夏;俞雅蓉;王大维
来源:中草药 2018 年 49卷 13期