目的 探究南葶苈子水提物(DS)对H2O2诱导的心肌H9c2细胞损伤的保护作用及潜在机制.方法 使用高效液相色谱与质谱联用方法分析鉴定DS中主要成分峰.采用H2O2处理制备H9c2细胞损伤模型,分为对照组、模型组、普罗布考组及DS 100、200、400 μg/mL组,MTT法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞自噬水平、线粒体膜电位;试剂盒检测细胞氧化应激相关指标;Incell-Western法检测凋亡通路关键蛋白和自噬标志性蛋白表达水平.结果 共分析鉴定了DS中含量最高的7种成分.与模型组比较,DS可以提高H9c2细胞活力(P<0.05、0.01)与细胞存活率(P<0.01),改善线粒体膜电位水平(P<0.01),调节凋亡通路关键蛋白Caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡;并能极显著降低细胞自噬水平(P<0.01),升高自噬标志性蛋白自噬微管相关蛋白轻链3B (LC3B)、p62表达水平(P<0.01),抑制心肌细胞自噬;降低心肌活性氧(ROS)水平(P<0.01),调节细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平(P<0.01),改善心肌细胞氧化应激.结论 DS可以有效保护由H2O2引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激、抑制细胞凋亡和自噬有关,其物质基础可能与所含的黄酮苷类
作者:郑晓珂;杨方方;张莉;白志尧;曾梦楠;樊慧;冯卫生
来源:中草药 2019 年 50卷 1期