目的 探讨氯化两面针碱对人食管癌Ecal09细胞的抑制作用及其诱导凋亡的分子机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度的氯化两面针碱不同的干预时间对Ecal09细胞的增殖抑制率.依据CCK-8法的结果将实验设4组,各组氯化两面针碱的终浓度分别为0、5、10、15 μmol/L,药物作用时间为48 h.以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡率;以实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测Caspase-3、Caspase-9和Noxa的mRNA表达;采用Western blotting法检测cleaved Caspase-3、Bcl-2、p53和Noxa的蛋白表达水平.结果 氯化两面针碱对Ecal09细胞具有增殖抑制作用,一定范围内呈时间和浓度依赖性.流式细胞术结果显示,5 μmol/L的氯化两面针碱主要诱发早期凋亡(P＜0.01);10、15μmol/L的氯化两面针碱主要诱发的是晚期凋亡(P＜0.01).qRT-PCR结果显示,Caspase-3、Caspase-9和Noxa的mRNA表达均随氯化两面针碱的浓度增加而升高,其中10、15 μmol/L组升高比较显著.Western blotting法结果显示,cleaved Caspase-3、p53和Noxa的蛋白水平均随氯化两面针碱浓度的增加而升高(P＜0.01),但Noxa的升高在5μnol/L组不显著,在10、15 μmol/L组升高明显(P＜0.01);Bcl-2蛋白的表达随着氯化两面针碱浓度的升高而降低,10、15 μmol/L组较为显著(P＜0.05、0.01)

作者：袁翠林；娄诤；谢璐迪；王大维

来源：中草药 2019 年 50卷 20期