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背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关.因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制cortactin基因表达对喉痛Hep-2细胞增殖和侵袭的影响.方法:构建含有cortactin基因的siRNA表达载体,转染Hep-2细胞,同时以转染空载体和空白细胞组作为对照(3组细胞分别命名为psilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2、psilencer3.1/Hep-2和Hep-2),G418筛选稳定转染的细胞;Western blot检测siRNA对cortactin蛋白表达的影响;MTT和平皿隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移侵袭能力.结果:成功构建获得cortactin缺陷型稳定转染细胞系pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2;与Hep-2细胞比较,pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2组细胞中cortaetin含量为11.22

作者:谭桂煌;曾龙武;侯素平;张庆丽;谢海龙

来源:中国癌症杂志 2010 年 20卷 5期

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作者:
谭桂煌;曾龙武;侯素平;张庆丽;谢海龙
来源:
中国癌症杂志 2010 年 20卷 5期
标签:
Hep-2细胞 siRNA cortactin 增殖 侵袭
背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关.因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制cortactin基因表达对喉痛Hep-2细胞增殖和侵袭的影响.方法:构建含有cortactin基因的siRNA表达载体,转染Hep-2细胞,同时以转染空载体和空白细胞组作为对照(3组细胞分别命名为psilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2、psilencer3.1/Hep-2和Hep-2),G418筛选稳定转染的细胞;Western blot检测siRNA对cortactin蛋白表达的影响;MTT和平皿隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移侵袭能力.结果:成功构建获得cortactin缺陷型稳定转染细胞系pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2;与Hep-2细胞比较,pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2组细胞中cortaetin含量为11.22