背景与目的：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，且患者死亡率居高不下，其中乳腺癌耐药是导致临床化疗失败的主要原因。该课题组采用已建立的乳腺癌耐药细胞模型MCF-7/ADR及其敏感株MCF-7，旨在探讨c-fos在乳腺癌耐药细胞中的详细作用机制。方法：MTT检测上述细胞对多柔比星的敏感性，并通过实时定量PCR(real-time PCR，RT-PCR)检测上述细胞中mdr-1及c-fos的mRNA表达情况；3μmol多柔比星分别处理MCF-7细胞12、24、36 h后采用RT-PCR检测细胞中c-fos mRNA的表达，以监测化疗药物处理过程中乳腺癌细胞c-fos的表达变化过程；构建相应载体得到了c-fos稳定干扰细胞株及其对照细胞株：MCF-7/ADR/si-fos-8B、MCF-7/ADR/si-fos-3D和MCF-7/ADR/siNC，采用MTT检测干扰c-fos后对5-FU及顺铂的敏感性变化；流式细胞术检测上述药物及γ射线照射处理后细胞凋亡的情况；罗丹明123检测乳腺癌耐药细胞的外排能力；RT-PCR及蛋白质印迹法(Western blot)分别检测c-fos干扰后，凋亡相关基因bax、bcl-2、puma、p53及mdr-1等的表达。结果：与敏感细胞MCF-7相比，MCF-7/ADR细胞中c-fos及mdr-1的表达显著升高，且对多柔比星的耐药倍数为敏感株的近40倍；在3μmol多柔比星处理MCF-7之后c-fos的表达逐渐升高，结果显示，c-fos在乳腺
作者：彭洪薇；师锐赞；袁向飞；熊冬生；魏筱华
来源：中国癌症杂志 2014 年 8期
